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為什么蛋白質(zhì)印跡條帶大小與預(yù)期的不同?
來源:測試GO 時間:2022-09-08 15:04:17 瀏覽:1404次

蛋白質(zhì)免疫印跡法,Western Blot,是在分子生物學、生物化學和免疫遺傳學等領(lǐng)域使用的一個重要實驗技術(shù)。其基本原理是利用特異性抗體對經(jīng)凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣本進行染色,并通過分析所染色的細胞部位和染色深度獲取有關(guān)特異蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達狀況變化的信號,目前已應(yīng)用于基因在蛋白質(zhì)水平上的表達研究、抗體活性測定,以及疾病早期治療等許多方面。

 實驗過程中的儀器展示圖

蛋白質(zhì)印跡法是一項根據(jù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)而分離蛋白質(zhì)的方法。一般蛋白質(zhì)越小,在膠上的移動速率就越高。但由于移動速率也會受到其它因子的影響,所以,觀測得到的實際條帶大小會和人們預(yù)期的結(jié)果有所不同。

 

常見的因素包括:

1.翻譯后修飾:例如磷酸化、糖基化等,可增加蛋白質(zhì)大小。

2.翻譯后切割:例如大多蛋白先被合成為前蛋白,然后被切割產(chǎn)生活性形式,例如前半胱天冬酶。

3.剪接變體和異形體:可變剪接和異形體可能從同一基因產(chǎn)生不同大小的蛋白質(zhì)。

4.相對電荷-氨基酸(帶電和不帶電)多聚體組分,例如蛋白質(zhì)的二聚化。這種情況通常在還原條件下需要防止,但強相互作用會導(dǎo)致較大的條帶出現(xiàn)。


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12條評論
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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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